將所需的培養(yǎng)基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內,點燃酒精燈,將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上,瓶口對準酒精燈,且放在距離酒精燈最近的位置,瓶蓋置于酒精燈的另一側。
生長在固體培養(yǎng)基上的霉菌菌絲可分為三部分:①營養(yǎng)菌絲:深入的培養(yǎng)基內,吸收營養(yǎng)物質的菌絲;②氣生菌絲:營養(yǎng)菌絲向空中生長的菌絲;③繁殖菌絲:部分氣生菌絲發(fā)育到一定階段,分化為繁殖菌絲,產生孢子。
革蘭染色法是細菌學中最廣泛使用的一種鑒別染色法。1884 年 由丹麥醫(yī)師 Gram 創(chuàng)立。方法是先將細菌用結晶紫染色,加媒染劑(增加染料和 細胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復染劑染色。如果細菌 不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽性菌(G+);如被脫色,而染上復染液的顏 色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細胞壁的細菌分為兩大類:革蘭 陽性菌和革蘭陰性菌。
盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應該注意
熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種技術手段。它通過在PCR體系中添加熒光基團來顯示DNA產物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的。并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。
RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?;驉盒栽錾陌准毎?,雜交瘤細胞的培養(yǎng),是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。