標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)RM(reference material)是具有準(zhǔn)確量值的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn),是具有一種或多種足夠均勻并已確定特性值的,用于校準(zhǔn)設(shè)備、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或給材料賦值的材料或物質(zhì)。應(yīng)用于化學(xué)測(cè)量、生物測(cè)量、工程測(cè)量、無力測(cè)量等領(lǐng)域。
纖維蛋白:是人類發(fā)現(xiàn)最早的一種凝血因子,呈伸長的橢球體,是由三對(duì)多肽鏈(一對(duì)α鏈、一對(duì)β鏈、一對(duì)γ鏈)以二硫鍵連接而成的二聚物,在肝臟中合成后進(jìn)入血漿,以溶解形式存在。
為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0. IMPa (121℃)維持15 ~ 30min即可徹底滅菌。長時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa (110℃) 滅菌20 ~ 30min某些對(duì)糖類要求更高的培養(yǎng)基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。
TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點(diǎn)是可同時(shí)分離一個(gè)樣品的RNA\DNA\蛋白質(zhì).TRIzol使樣品勻漿化,細(xì)胞裂解,溶解細(xì)胞內(nèi)含物,同時(shí)因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。在加入lv仿離心后,溶液分為水相和有機(jī)相,RNA在水相中。取出水相用異丙醇沉淀可回收RNA;用乙醇沉淀中間層可回收DNA;用異丙醇沉淀有機(jī)相可回收蛋白質(zhì)。
最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。如果不是新鮮的(最好在半年之內(nèi),-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復(fù)凍融,從冰凍狀態(tài)拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預(yù)冷的勻漿器中,然后加入一定量的TRIZOL試劑,然后勻漿。
分子生物學(xué)是指在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué),從生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。研究內(nèi)容包括各種生命過程,如光合作用、發(fā)育的分子機(jī)制、神經(jīng)活動(dòng)的機(jī)理、癌的發(fā)生等。
高純?cè)噭┦欠从郴瘜W(xué)試劑純度高低的一個(gè)類別概念,它表示,該試劑中起干擾作用離子的相對(duì)量很少;該試劑可以被用于一般的定量分析實(shí)驗(yàn)。比如,色譜用的乙腈,是一種高純?cè)噭?/p>
細(xì)胞中的DNA合成有兩條途徑:一條途徑是生物合成途徑(“D途徑”),即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,為DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中,葉酸作為重要的輔酶參與這一過程,而HAT培養(yǎng)液中氨基蝶呤是一種葉酸的拮抗物,可以阻斷DNA合成的“D途徑”。
組蛋白是構(gòu)成真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白,富含帶正電荷的Arg和Lys等堿性氨基酸,等電點(diǎn)一般在pH10.0以上,屬堿性蛋白質(zhì),可以和酸性的DNA緊密結(jié)合,而且一般不要求特殊的核苷酸序列。
細(xì)胞融合(cell fusion),細(xì)胞遺傳學(xué)名詞,是在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下,兩個(gè)細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個(gè)雜種細(xì)胞?;具^程包括細(xì)胞融合形成異核體(heterokaryon)、異核體通過細(xì)胞有絲分裂進(jìn)行核融合、最終形成單核的雜種細(xì)胞。細(xì)胞融合可作為一種實(shí)驗(yàn)方法被廣泛適用于單克隆抗體的制備,膜蛋白的研究。