牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用, 例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA, 通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。
B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細(xì)胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無(wú)限生長(zhǎng)的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價(jià)、單一的特異性抗體.這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。
緩沖液在電泳過(guò)程中的一個(gè)作用是維持合適的pH。電泳時(shí)正極與負(fù)極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng),正極發(fā)生的是氧化反應(yīng)(4OH--4e->2H2O+O2),負(fù)極發(fā)生的是還原反應(yīng)(4H++4e->2H2),長(zhǎng)時(shí)間的電泳將使正極變酸,負(fù)極變堿。一個(gè)好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力,是溶液兩極的pH保持基本不變。
一般是通過(guò)生化方法吧蛋白提取出來(lái),蛋白質(zhì)帶有電荷么,是將混合樣品中的蛋白質(zhì),其原理是第一向基于蛋白質(zhì) PI 不同用等電聚焦,電泳時(shí)的正極與負(fù)極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng),向著與其電性相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電泳。
多數(shù)有機(jī)化合物,易溶于有機(jī)溶劑而難溶于水。但是當(dāng)有機(jī)化合物分子中含有能夠同水形成氫鍵的羥基、磺基等時(shí),該有機(jī)化合物也有可能溶于水中。
HPLC的純度鑒定:對(duì)于HPLC因?yàn)槌S玫南到y(tǒng)較少,加之其分離效果好,一般不要求選擇三種分子間作用力不同的溶劑系統(tǒng),只要求選這三種不同極性的溶劑系統(tǒng),使目標(biāo)峰在不同的保留時(shí)間出峰。
緩沖溶液是指由弱酸及其共軛堿(或弱堿及其共軛酸)所組成的緩沖對(duì)配制的,且能夠在加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿時(shí),可以有效減緩pH值改變的水溶液。緩沖溶液能幫助維持分析方法的穩(wěn)定,而不會(huì)因?yàn)槲⑷醯沫h(huán)境改變的情況下而造成分析結(jié)果的改變。
取出細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過(guò)的細(xì)胞培養(yǎng)皿里,PBS洗三遍。注意有的時(shí)候作的細(xì)胞爬片可能比較小,因此夾取的時(shí)候要小心。
滴定分析的化學(xué)反應(yīng)要具備的條件,反應(yīng)必須按方程式定量地完成,通常要求在99.9%以上,這是定量計(jì)算的基礎(chǔ)。反應(yīng)能夠迅速地完成(有時(shí)可加熱或用催化劑以加速反應(yīng))。
具備緩沖作用的緩沖溶液,通常針對(duì)溶液中放入一定量的酸和堿,能夠起到防止溶液PH值產(chǎn)生一定變化的良好作用。一般來(lái)說(shuō),弱酸以及其鹽溶液混合而成的溶液、弱堿與其鹽溶液進(jìn)行混合的溶液等,都可以被稱為緩沖溶液。能夠產(chǎn)生對(duì)酸的緩沖作用,是由于其中的弱酸根離子的原因。如果向該溶液里面滴加定量的強(qiáng)酸物質(zhì),氫離子勢(shì)必要被弱酸根離子消耗完。這樣就能維持PH的固定值,使其不會(huì)變化。如果加入適量強(qiáng)堿,溶液里的弱酸會(huì)消耗氫氧根離子,從而阻礙PH發(fā)生改變。