RNase酶非常穩(wěn)定,是導(dǎo)致RNA降解最主要的物質(zhì)。它在一些極端的條件可以暫時失活,但限制因素去除后又迅速復(fù)性。用常規(guī)的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的RNase完全失活。為了獲得高質(zhì)量的真核細胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法,最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。
蘇木素-伊紅(hematoxylin/eosin)染色法是一種用普通光學顯微鏡觀察凋亡細胞形態(tài)學特征的簡便方法。細胞凋亡時主要的形態(tài)學變化為細胞體積變小,胞質(zhì)濃縮,染色質(zhì)高度凝集、邊緣化,呈新月狀,隨后染色質(zhì)裂解成大小不等的塊狀,核膜裂解,細胞以類似胞吐的方式形成凋亡小體。蘇木素容易被氧化,其氧化產(chǎn)物蘇木紅是真正的染料,蘇木紅與鋁結(jié)合形成一種帶正電荷的藍色色精,呈堿性。帶負電荷的脫氧核糖核酸根和帶正電荷的藍色色精進行極性吸附而完成細胞核的染色。伊紅可分為幾種,如伊紅Y和伊紅B等。伊紅Y是一種酸性紅色胞質(zhì)性染料,對細胞質(zhì)、肌纖維及膠原纖維具有著色性,呈粉紅色。細胞經(jīng)HE染色后,細胞核呈藍紫色,細胞質(zhì)呈粉紅色,根據(jù)凋亡細胞的形態(tài)學特征可觀察細胞凋亡的情況。
rRNA在蛋白質(zhì)合成中的功能尚未完全明了。但16 S的rRNA3’端有一段核苷酸序列與mRNA的前導(dǎo)序列是互補的,這可能有助于mRNA與核糖體的結(jié)合。
細菌在適宜的條件下,適合生長的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部,經(jīng)過一定時間的培養(yǎng),分裂繁殖出巨大數(shù)量的菌體,形成一個肉眼可見,有一定形態(tài)的獨立群體,稱為菌落。
別構(gòu)酶具有別構(gòu)效應(yīng),即一些小分子化合物與酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特異結(jié)合,引起酶蛋白分子構(gòu)象變化,從而改變酶的活性。
酸式滴定管的玻璃活塞是固定配合該滴定管的,所以不能任意更換。要注意玻塞是否旋轉(zhuǎn)自如,通常是取出活塞,拭干,在活塞兩端沿圓周抹一薄層凡士林作潤滑劑(或真空活塞油脂),然后將活塞插入,頂緊,旋轉(zhuǎn)幾下使凡士林分布均勻(幾乎透明)即可,再在活塞尾端套一橡皮圈,使之固定。注意凡士林不要涂得太多,否則易使活塞中的小孔或滴定管下端管尖堵塞。在使用前應(yīng)試漏。
效應(yīng)階段是指免疫應(yīng)答產(chǎn)生的效應(yīng)產(chǎn)物(抗體、細胞因子和效應(yīng)T細胞)發(fā)揮免疫效應(yīng),清楚非己抗原或誘導(dǎo)免疫耐受,維持機體平衡或誘發(fā)免疫相關(guān)性疾病的階段。
凝膠色譜不同于以上三種分離方法。凝膠色譜是根據(jù)分子大小用分子篩效應(yīng)來分離樣品組分的。這個方法也叫排阻色譜或粒度排阻色譜。具有一定孔徑的多孔性合成聚合物經(jīng)常用作填料。
化學反應(yīng)的速度隨溫度增高而加快,但酶是蛋白質(zhì),可隨溫度的升高而變性。在溫度較低時,前一影響較大,反應(yīng)速度隨溫度升高而加快。但溫度超過一定范圍后,酶受熱變性的因素占優(yōu)勢,反應(yīng)速度反而隨溫度上升而減慢。常將酶促反應(yīng)速度最大的某一溫度范圍,稱為酶的最適溫度